近日，植物保護學院李向東教授團隊在《Plant Biotechnology Journal》在線發表了題為“Epitope mapping and a cocktail of monoclonal antibodies to achieve full detection coverage of potato virus Y”的研究論文。該研究篩選到識別馬鈴薯Y病毒（potato virus Y，PVY）衣殼蛋白（coat protein，CP）不同表位的4個單克隆抗體，并得到了能檢測所有PVY分離物的單克隆抗體組合。

血清學方法在植物病毒的檢測中起著至關重要的作用。但是，多克隆抗體可能會與非靶標病毒發生交叉反應，導致出現錯檢。單克隆抗體具有更高的特異性，但有些單克隆抗體只能檢測到部分病毒分離物，導致漏檢現象。PVY是馬鈴薯Y病毒屬（Potyvirus）的代表種，主要侵染馬鈴薯、煙草、辣椒、番茄等茄科作物，嚴重影響作物產量和品質。之前研究表明，利用國際上廣泛使用的PVY單克隆抗體MAb1128、MAb1129和MAb1130檢測時，20.10%、48.57%和12.73%的PVY分離物會出現漏檢現象。

研究人員從54個單克隆抗體中篩選到4個識別不同表位的單克隆抗體N1、M1、M2和C1。通過刪除突變以及丙氨酸掃描等分析，確定N1、M1、M2和C1識別的最小表位分別為4TIDAGGSTK12，37GTSGTHTVP45，89QFDTWYE95和261LLGVKN266。這四個單克隆抗體識別的抗原表位與國際上廣泛使用的PVY單克隆抗體MAb1128、MAb1129和MAb1130不同，而且在PVY CP中相對保守。截至2022年4月12日，GenBank中有1885個PVY CP序列，含有N1、M1、M2和C1識別表位的PVY分離物個數分別為694、1853、1843和1851。將檢測范圍較廣的M1、M2和C1進行組合，發現M1和M2組合可檢測所有1885個PVY分離物，M1和C1組合可檢測1883個PVY分離物，M2和C1組合可檢測1876個PVY分離物。該研究通過將識別CP不同抗原表位的單克隆抗體進行科學組合，實現了所有分離物的全覆蓋檢測。這種方法可應用于其它植物病毒和動物病毒所有分離物的檢測，可有效防止漏檢現象。

圖1 單克隆抗體的抗原表位鑒定及可檢測所有PVY分離物單抗組合的確定

山東農業大學碩士研究生趙翠玲、朱青和牟修岐為共同第一作者，李向東教授和閆志勇博士為共同通訊作者，耿超副教授、田延平教授和原雪峰教授參與了研究工作。該研究受到國家自然科學基金國際合作重點項目(31720103912)以及山東省泰山學者建設工程(TS201712023)的資助。

原文鏈接：https://doi.org/10.1111/pbi.14094

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